桑黃是桑黃屬(Sanghuangporus)真菌的統(tǒng)稱。該屬目前已知有桑樹桑黃Sanghuangporus sanghuang、楊樹桑黃Sanghuangporus vaninii、暴馬桑黃Sanghuangporus baumii等14個種[1,2]。桑黃藥用歷史悠久,在《藥性論》《本草綱目》和《神農(nóng)本草經(jīng)》等著作中均有桑黃及其藥效的明確記載,也被現(xiàn)代人稱為“森林黃金”[3]。現(xiàn)代研究表明,桑黃主要活性成分有多糖類、多酚類和萜類等,具有抗腫瘤、抗氧化、抗炎抑菌、降血糖等藥理作用[4,5]。隨著桑黃的藥用功效逐漸被人們所認(rèn)識,近年來我國人工栽培桑黃產(chǎn)業(yè)得到快速發(fā)展,目前人工栽培的主要種類為楊樹桑黃(S. vaninii),栽培方式以段木栽培和代料栽培為主。但是因栽培菌種、栽培地區(qū)氣候、栽培基質(zhì)及栽培模式的不同,尚沒有統(tǒng)一的栽培標(biāo)準(zhǔn)。因地制宜開展桑黃人工栽培技術(shù)研究,是促進桑黃產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要途徑。東北地區(qū)受溫帶季風(fēng)氣候影響,四季分明,夏季高溫多雨,冬季寒冷干燥,具有人工栽培桑黃的優(yōu)越氣候條件。夏秋季節(jié)是野生食藥用菌的高發(fā)期,也是人工栽培桑黃子實體生長的最佳時期,實踐證明適當(dāng)?shù)臏夭畲碳び欣谏|S子實體形成。本文對東北地區(qū)段木栽培桑黃的栽培設(shè)施要求、各級菌種制作、菌段制作、出黃管理、病蟲害防控等各環(huán)節(jié)技術(shù)進行集成,旨在為桑黃生產(chǎn)者提供參考,為桑黃產(chǎn)業(yè)發(fā)展做出貢獻。
桑黃人工段木栽培流程:母種制作→原種制作→栽培種制作→菌段制作→菌段開口→催芽→出黃管理→采收。
東北地區(qū)桑黃人工栽培通常在室外大棚內(nèi)進行,搭棚場地一般選在遠離村莊的林區(qū),周圍有水源,場地土質(zhì)保水性好、地勢平坦或稍有坡度。
1.2 大棚搭建及消毒
大棚一般采用鋼架結(jié)構(gòu),選擇有利于通風(fēng)的朝向搭建,要求棚長不超過30 m,跨度10 m左右,棚高2.6 m,大棚兩頭開寬2 m的門,兩側(cè)設(shè)卷膜桿留通風(fēng)口,有利于通風(fēng)管理。大棚塑料膜外通常使用兩層遮陽網(wǎng)覆蓋,遮陽網(wǎng)遮陽率外層用75%,內(nèi)層用95%,使得棚內(nèi)光照強度在500 lx左右,以利于桑黃子實體生長。在大棚兩側(cè)挖排水溝,防止棚內(nèi)積水。
大棚在覆蓋塑料膜和遮陽網(wǎng)前,內(nèi)部的栽培場地一般是翻耕后陽光曝曬2天,然后鋪上厚約5 cm的河沙或風(fēng)化砂。棚內(nèi)可作成3個寬約2.8 m、長與棚等長的畦,畦與畦之間留有過道。大棚搭建好后需要對地面及棚內(nèi)進行消毒,通常在地面撒上一層生石灰,并使用保菇王消毒粉(主要有效成分為二氯異氰尿酸鈉,使用量為8~10 g/m3),對大棚進行熏蒸。
(1)母種(一級種,圖1)制作。選擇野生桑黃馴化后的種性清楚、農(nóng)藝性狀穩(wěn)定的菌種作為種源。桑黃母種培養(yǎng)基可選用①PDA培養(yǎng)基:馬鈴薯200 g(去皮切成1 cm立方塊,加水煮沸15 min過濾取汁液)、葡萄糖20 g、磷酸二氫鉀3 g、硫酸鎂1.5 g、瓊脂粉15 g、純凈水1 000 mL,pH自然;②馬鈴薯木屑綜合培養(yǎng)基:馬鈴薯200 g(處理方法同上)、木屑20 g(水煮30 min過濾取濾液)、葡萄糖20 g、瓊脂粉15 g、水1 000 mL,pH自然。
滅菌:制作好的培養(yǎng)基裝入試管,高溫高壓121 ℃下保持30 min,待溫度降至80 ℃左右時,取出試管擺成斜面冷卻,3~5天后觀察,確保無雜菌出現(xiàn)方可進行母種生產(chǎn)。母種擴繁:挑選無雜菌污染的菌種,將菌絲尖端接種至斜面試管中,置于30 ℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)2天,待菌絲萌發(fā)后將溫度調(diào)至28 ℃,繼續(xù)培養(yǎng)約10天即可用于轉(zhuǎn)管擴繁,1支試管通??梢詳U繁30支母種。培養(yǎng):接種后的試管放入28 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),培養(yǎng)期間每天檢查并做好記錄,如發(fā)現(xiàn)有雜菌污染的試管須及時挑出。(2)原種(二級種,圖2)制作??刹捎霉攘E囵B(yǎng)基或木屑培養(yǎng)基。谷粒培養(yǎng)基:選用籽粒飽滿、無雜質(zhì)、無霉變的玉米?;蛐←溋#们逅?~7天,期間每天更換一次清水以防變質(zhì),待谷粒充分吸水后,撈出加入5%左右的含水量為60%的木屑拌勻,再裝入500 mL的透明玻璃瓶或聚乙烯塑料瓶滅菌。木屑培養(yǎng)基:配方為優(yōu)質(zhì)新鮮柞木屑80%、麥麩16%、黃豆粉2%、蔗糖1%、石膏1%,使用篩料機將木屑雜質(zhì)去除,干料按比例混合均勻后加水?dāng)嚢瑁购吭?0%~65%后裝瓶滅菌。
滅菌接種:一般采用常壓滅菌,105 ℃下保持8 h;高溫高壓滅菌為121 ℃下保持2 h。滅菌完畢后出鍋冷卻,在無菌接種室內(nèi)超凈工作臺上進行接種,通常1支試管母種可以接5~6瓶原種。培養(yǎng):培養(yǎng)室保持溫度在28 ℃,暗培養(yǎng),每天早、晚各通風(fēng)20 min,30天左右菌絲即可長滿。
(3)栽培種(三級種,圖3)制作。培養(yǎng)基配方:優(yōu)質(zhì)新鮮柞木屑82%、麥麩14%、黃豆粉2%、生石灰1%、石膏1%。菌袋選擇折徑16.1 cm、長37 cm、厚0.005 cm的聚乙烯塑料袋,使用裝袋機裝料,每袋裝濕料1.4 kg左右,裝好后料高約21 cm,中心孔通透。使用窩口機向內(nèi)窩口,深3~4 cm,以能塞住菌塞又不碰到培養(yǎng)料為度。滅菌方法與原種相同。
接種培養(yǎng):在無菌接種室內(nèi)的接種箱或超凈工作臺下完成接種,1瓶原種可以接50~60瓶栽培種;培養(yǎng)方法與原種相同。
2.2 栽培菌段制作
2.2 栽培菌段制作
裝袋:選擇直徑4~12 cm、長18~20 cm的新鮮柞木段,將木段劈開后樹皮朝外裝入折徑24 cm、長45 cm、厚0.014 cm的聚乙烯塑料袋(重14 g)中,制成直徑16 cm的圓柱形緊實木捆。裝袋時木塊間避免有大的縫隙,并防止扎破料袋,以免造成后期易感染雜菌。向裝好的袋內(nèi)加入150~200 g蒸餾水,使袋內(nèi)含水量達60%左右,再用尼龍繩扎緊封口。
滅菌:采用高壓滅菌,溫度118~119 ℃保持16 h。滅菌后置于冷卻室內(nèi)待冷卻后接種。接種:在接種室內(nèi)使用接種箱或在超凈工作臺上進行。先將栽培種袋表用75%的酒精擦拭消毒,再剪去袋口,將菌種搗碎成直徑為1 cm的顆粒,倒入木段中,使菌種完全覆蓋木段表面,然后封口,完成接菌。培養(yǎng):將接好種的栽培段轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)層架上避光培養(yǎng)(圖4),前一周溫度設(shè)定為30 ℃,待菌種定植后降到28 ℃,期間根據(jù)培養(yǎng)室實際情況控制通風(fēng)次數(shù),經(jīng)80~90天培養(yǎng),菌絲可長滿袋。
菌絲滿袋后的桑黃菌段,表面呈淡黃色或黃色,菌絲和菌袋貼合不夠緊密,此時菌絲不夠成熟,須進行轉(zhuǎn)色管理。通過打開門窗和培養(yǎng)室燈光增加散射光照射的方法,使菌段表面菌絲老化,形成紅棕色菌皮及肉眼可見的瘤狀突起,待菌袋收縮、緊實有彈性時,即完成轉(zhuǎn)色(圖5)。這一過程通常需要15~20天,只有轉(zhuǎn)色好的菌段才可以進入大棚,進行開口出菇。
根據(jù)擺放的方式,菌段開口的方法有兩種,即底部開口和頂部開口。底部開口:將轉(zhuǎn)色好的菌段扎口處朝上直立擺放,使用75%酒精對菌段和開口刀具進行消毒,在菌段底部距離邊緣2~3 cm處開直徑為5 cm的圓形口,便于菌段吸收水分;在菌段上部1/3處,均勻開3個長5~8 cm、寬1~2 cm的拱橋形出黃口,將開好口的菌袋在大棚內(nèi)呈“品”字形擺放,間距10~12 cm,底部埋入深約2 cm的沙土,周邊壓實,防止桑黃從底部長出,徒耗菌段養(yǎng)分。
頂部開口:將菌段頂部扎口處用剪刀剪去,倒立擺放,其他處理同底部開口法。
催芽即桑黃開口處菌絲恢復(fù)并長出原基的過程。高溫高濕有利于開口處菌絲恢復(fù),桑黃菌段開口后,在生產(chǎn)中通常采取外罩黑色塑料袋的方法進行催芽(圖6),既可防止開口處菌絲干燥死亡,又可避免水直接噴濺到開口處,影響菌絲恢復(fù)。保持棚內(nèi)空氣濕度在85%~90%,關(guān)閉棚門及通風(fēng)口,期間需要抖動塑料袋,防止缺氧導(dǎo)致桑黃原基畸形。待桑黃子實體長出0.5~1 cm時可以摘去塑料袋,進行出黃管理。
出黃階段主要通過覆蓋遮陽網(wǎng)、控制噴水和通風(fēng)的頻次調(diào)節(jié)大棚內(nèi)溫濕度和二氧化碳濃度等環(huán)境因素。桑黃出黃適宜溫度在26~28 ℃,過高易滋生雜菌;濕度宜80%~90%,最好采用霧化設(shè)備噴水,使達到地面濕潤不積水、菌段和子實體有彈性的效果,避免子實體表面積水影響品相。
通風(fēng)次數(shù)和時間根據(jù)季節(jié)進行調(diào)控,一般每天早晚各通風(fēng)10 min。段木栽培桑黃按季節(jié)分階段管理,每年8月下旬至10月中旬的夏秋時節(jié),桑黃子實體生長速度最快,是出黃管理的關(guān)鍵時期,直接影響桑黃產(chǎn)量。
6.1 春季管理
4月末至5月初,越冬后的桑黃開始進行噴水管理,此時菌段失水較嚴(yán)重,采用少噴勤噴的方法,使菌段緩慢吸水并恢復(fù)生長。又由于此時期棚內(nèi)地溫較低,晝夜溫差大,不利于子實體生長,因此每天要加強通風(fēng),避免子實體表面積水而產(chǎn)生綠色木霉等雜菌。
6.2 夏季管理
6月隨著氣溫升高,大棚內(nèi)地溫也升高,桑黃子實體進入生長期,此時需要增加噴水次數(shù)和噴水量,噴水量以保證地面土質(zhì)有充足水分又不積水為度。但由于氣溫不穩(wěn)定,遇到氣溫較低的陰雨天時,不宜噴水,需打開通風(fēng)口加大通風(fēng)量,防止雜菌產(chǎn)生。進入伏天后,空氣潮濕悶熱,桑黃子實體生長緩慢,極易產(chǎn)生雜菌,此時大棚須增覆遮陽網(wǎng)、增加噴水,對菌段進行降溫,大棚通風(fēng)口保持長時間打開狀態(tài)。
6.3 秋季管理
秋季是桑黃生長最佳時期。每年9月以后,天氣逐漸涼爽,晝夜溫差較大,通過去掉大棚外一層遮陽網(wǎng),菌段上加蓋1層遮陽網(wǎng),達到增加棚內(nèi)溫度、減小光照強度的目的。此時減少噴水次數(shù),通常白天噴水1~2次,每次5分鐘。
6.4 冬季管理
冬季桑黃子實體進入休眠期,當(dāng)室外溫度接近0 ℃時,對棚內(nèi)地面澆透水,然后封閉大棚。期間做好大棚的加固工作,防止大風(fēng)和大雪破壞大棚。
7 采收及儲存
段木栽培桑黃通常培養(yǎng)至第三年時進行采收,秋季當(dāng)桑黃菌蓋邊緣顏色變深、停止生長并放射出大量的孢子(菌蓋表面可見黃綠色粉末)時,標(biāo)志著桑黃子實體成熟。此時可停止噴水,打開大棚門及通風(fēng)口進行通風(fēng),降低棚內(nèi)濕度,晾干子實體表面水分,經(jīng)一周左右即可進行采收。采收后先清理子實體表面雜物,在晾曬場進行初步晾曬,隨后置于烘干爐,烘干溫度設(shè)定40 ℃、45 ℃、50 ℃各1~2 小時。裝爐時不可劃傷、弄臟子實體腹面,保持其色澤。烘干后按照桑黃子實體的品質(zhì)進行等級分類,裝入自封袋內(nèi),置于通風(fēng)干燥室內(nèi)密封保存。
8.1 病害
桑黃人工栽培過程中,病害主要為侵染性病害,發(fā)生在菌種培養(yǎng)期和出黃期間。其中,以青霉、木霉、黃曲霉為主的雜菌污染(圖8)對桑黃影響最大,發(fā)生在生產(chǎn)各個環(huán)節(jié),一旦發(fā)現(xiàn)要及時挑出,避免其成熟后產(chǎn)生孢子四散傳播,加重危害。并加強培養(yǎng)室和大棚的通風(fēng),使用75%酒精對發(fā)生區(qū)域進行噴灑消毒。
圖8 霉菌侵染桑黃子實體
造成雜菌侵染的因素有多種,包括菌種不純,滅菌不徹底,接種環(huán)境不清潔、操作不規(guī)范,培養(yǎng)室消毒不徹底,菌袋有微孔等。發(fā)生在菌袋內(nèi)部的雜菌難以處理。出黃期間桑黃子實體受到雜菌侵染時,可通過改變環(huán)境條件和科學(xué)使用藥品殺滅雜菌,同時對發(fā)生區(qū)域進行全面消殺。
8.2 蟲害
蟲害主要發(fā)生在桑黃出黃階段,以菌蚊、夜蛾幼蟲及蛞蝓為主。其中,夜蛾幼蟲對桑黃的危害最大(圖9):成蟲將卵產(chǎn)到子實體腹面,幼蟲孵出后直接啃食子實體,使腹面出現(xiàn)傷口,乃至被吃光,對于剛長出的桑黃甚至可以啃食殆盡。幼蟲為害時,可在桑黃子實體的下方地面上看到黑色顆粒狀幼蟲糞便。
蟲害防治措施有抓好環(huán)境衛(wèi)生,清除大棚周圍雜草,使用黃色粘蟲板或蚊蟲燈誘殺成蟲,及時捕捉幼蟲,在棚外拉防蟲網(wǎng)阻擋害蟲進入等[6]。