【作者】耿雪冉 張巧毅 常明昌 徐麗婧 程艷芬 王賀祥

【機(jī)構(gòu)】山西農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院 黃土高原食用菌提質(zhì)增效協(xié)同創(chuàng)新中心 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)東方科技學(xué)院 中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)生物技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

【摘要】依次采用離子交換層析（DEAE-Cellulose、CM-Cellulose和SP-Sepharose）和凝膠過濾層析（Superdex75 HR10/300 GL）從三色雷蘑（Leucopaxillus tricolor）子實(shí)體中分離純化得到一種核糖核酸酶（Ribonuclease,RNase）。該酶比活為1406 U/mg,純化倍數(shù)為154,通過HPLC-LTQ-Orbitrap測(cè)序得到4條肽段序列,分別為DMAVSYLSR、IGLSSIPR、ILGRFVVDTYK和SGKANAATPK。該核糖核酸酶的相對(duì)分子質(zhì)量為15000,最適反應(yīng)pH為9.0,最適反應(yīng)溫度為40℃,熱穩(wěn)定性高,80℃孵育1 h后能保持90%以上的活性:Cu2+、Ca2+、Mn2+、Cd2+和Al3+在1.25～10 mmol/L濃度下對(duì)該酶活性具有抑制作用,且抑制作用隨著金屬離子濃度的升高而變強(qiáng);Fe2+在1.25～5 mmol/L的濃度下,Pb2+、Zn2+、Mg2+、Hg2+、Fe3+在1.25～2.5 mmol/L的濃度下對(duì)該酶的活性有促進(jìn)作用。  

【關(guān)鍵詞】酶活力; 氨基酸序列; 相對(duì)分子質(zhì)量; pH; 溫度; 金屬離子;