【作者】戚元成 李建立 邱立友 申進文 王瑞霞
【機構(gòu)】河南農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所農(nóng)業(yè)部南方食用菌資源利用重點實驗室國家食用菌工程技術(shù)研究中心上海市農(nóng)業(yè)遺傳育種重點實驗室
摘要：根據(jù)肺形側(cè)耳(Pleurotus pulmonarius)產(chǎn)孢相關(guān)基因stpp1,采用反轉(zhuǎn)錄PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)技術(shù)克隆出糙皮側(cè)耳(P.ostreatus)產(chǎn)孢相關(guān)基因同源物stpo1全長,并對其保守域進行生物信息學(xué)分析,使用pEASY-E2原核表達系統(tǒng)進行該基因的原核表達,通過熒光定量PCR分析stpo1表達模式。結(jié)果表明:糙皮側(cè)耳stpo1全長cDNA序列為2556bp,預(yù)測編碼851個氨基酸的蛋白質(zhì),具有錯配修復(fù)DNA結(jié)合域(MUTSd)、ATP結(jié)合位點(ABC-ATPase)以及錯配修復(fù)域(MutS),屬于錯配修復(fù)家族。十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)顯示stpo1在原核細胞中具有表達活性,定量PCR顯示stpo1在糙皮側(cè)耳不同發(fā)育階段顯現(xiàn)不同的表達水平并且在成熟子實體菌褶中的表達量明顯高于其它部位,表明該基因可能與糙皮側(cè)耳的孢子形成有相關(guān)性。
基金：國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系專項資金(CARS-24)； 河南省高等學(xué)校重點科研項目(13B180051)； 河南省高等學(xué)校重點科研項目(14A180023)資助；
關(guān)鍵詞：糙皮側(cè)耳; 產(chǎn)孢相關(guān)基因stpo1; RT-PCR; 原核表達; 表達模式;
【機構(gòu)】河南農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所農(nóng)業(yè)部南方食用菌資源利用重點實驗室國家食用菌工程技術(shù)研究中心上海市農(nóng)業(yè)遺傳育種重點實驗室
摘要：根據(jù)肺形側(cè)耳(Pleurotus pulmonarius)產(chǎn)孢相關(guān)基因stpp1,采用反轉(zhuǎn)錄PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)技術(shù)克隆出糙皮側(cè)耳(P.ostreatus)產(chǎn)孢相關(guān)基因同源物stpo1全長,并對其保守域進行生物信息學(xué)分析,使用pEASY-E2原核表達系統(tǒng)進行該基因的原核表達,通過熒光定量PCR分析stpo1表達模式。結(jié)果表明:糙皮側(cè)耳stpo1全長cDNA序列為2556bp,預(yù)測編碼851個氨基酸的蛋白質(zhì),具有錯配修復(fù)DNA結(jié)合域(MUTSd)、ATP結(jié)合位點(ABC-ATPase)以及錯配修復(fù)域(MutS),屬于錯配修復(fù)家族。十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)顯示stpo1在原核細胞中具有表達活性,定量PCR顯示stpo1在糙皮側(cè)耳不同發(fā)育階段顯現(xiàn)不同的表達水平并且在成熟子實體菌褶中的表達量明顯高于其它部位,表明該基因可能與糙皮側(cè)耳的孢子形成有相關(guān)性。
基金：國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系專項資金(CARS-24)； 河南省高等學(xué)校重點科研項目(13B180051)； 河南省高等學(xué)校重點科研項目(14A180023)資助；
關(guān)鍵詞：糙皮側(cè)耳; 產(chǎn)孢相關(guān)基因stpo1; RT-PCR; 原核表達; 表達模式;