【作者】劉守安　李多川　張燕　郭芳先　俄世瑾

【機構(gòu)】山東農(nóng)業(yè)大學(xué)環(huán)境生物系　山東農(nóng)業(yè)大學(xué)環(huán)境生物系 泰安271018

【摘要】嗜熱毛殼菌ChaetomiumthermophilumCT2可產(chǎn)生具有重要工業(yè)生產(chǎn)價值的纖維素酶類。RT-PCR擴增cbh1成熟蛋白的編碼基因,利用基因重組的方法構(gòu)建可在畢赤酵母分泌表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)纖維二糖水解酶的重組表達(dá)載體,并轉(zhuǎn)化畢赤酵母得到重組子。在畢赤酵母醇氧化酶AOX1基因啟動子的作用下,重組蛋白得到高效表達(dá),小規(guī)模發(fā)酵量達(dá)1.42mg/mL。表達(dá)蛋白分泌到培養(yǎng)基中,分子量約80kD;以脫脂棉為底物測得酶活為21U/mL。表達(dá)蛋白在60℃穩(wěn)定,70℃保溫60分鐘仍保持90%的酶活力,具有較高的熱穩(wěn)定性。 

【基金】國家863計劃資助項目(2003AA241162)； 國家自然科學(xué)基金(30270013,30170013)；

【關(guān)鍵詞】纖維素酶; 整合表達(dá); 羧甲基纖維素;