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    實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)球孢白僵菌熱休克蛋白基因hsp70在幾種脅迫條件下的表達(dá)


    【發(fā)布日期】:2019-01-10  【來源】:菌物學(xué)報(bào)
    【作者】謝翎 陳紅梅 湯強(qiáng) 蒲順昌 李增智 黃勃
    【機(jī)構(gòu)】安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)微生物防治省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 安慶師范學(xué)院生命科學(xué)系
    摘要:本研究運(yùn)用Realtime-PCR技術(shù),對(duì)球孢白僵菌Beauveria bassiana hsp70基因在不同脅迫條件下的表達(dá)情況進(jìn)行了檢測(cè)。從mRNA轉(zhuǎn)錄水平探討了不同脅迫條件對(duì)球孢白僵菌hsp70基因表達(dá)的影響。結(jié)果表明:38℃高溫脅迫下,30min時(shí)表達(dá)量達(dá)到最高峰,為對(duì)照樣品的10.18倍。隨后表達(dá)量開始下降,至180min時(shí),其表達(dá)量降為最低,為對(duì)照樣品的2.85倍;4℃低溫脅迫下,2h檢測(cè)到hsp70的表達(dá)量下降至最低點(diǎn),為對(duì)照樣品的0.25倍。隨后表達(dá)量開始回升,至10h表達(dá)量始終維持在對(duì)照樣品的1.4-1.5倍左右;紫外脅迫下(波長(zhǎng)253.7nm),3min后hsp70的表達(dá)量快速上升至最高峰,為對(duì)照樣品的2.33倍。隨后表達(dá)量迅速下降,至60min表達(dá)量始終維持在對(duì)照樣品的0.2倍左右。因此推測(cè),hsp70基因在球孢白僵菌抵抗高溫、低溫和紫外三種脅迫方面都可能具有重要作用。同時(shí)研究結(jié)果也表明,球孢白僵菌hsp70基因啟動(dòng)子在逆境下可引導(dǎo)基因高效表達(dá),因而在抗逆工程菌株構(gòu)建方面可能具有重要的應(yīng)用價(jià)值。
    基金:國家“863”項(xiàng)目(No.2006AA10A212); 新世紀(jì)優(yōu)秀人才支持計(jì)劃(No.05-0560); 安徽省優(yōu)秀青年科技基金(No.08040106902); 安徽省級(jí)自然科學(xué)研究重點(diǎn)項(xiàng)目(No.TD200708);
    關(guān)鍵詞:昆蟲病原真菌; 基因表達(dá)定量分析; Taqman探針;
     
     
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