【作者】胡樂琴 姚泉洪 陳明杰 熊愛生 潘迎捷

【機(jī)構(gòu)】南京農(nóng)業(yè)大學(xué)資環(huán)學(xué)院；上海農(nóng)科院生物技術(shù)研究中心；上海農(nóng)科院食用菌研究所；農(nóng)業(yè)部食用菌遺傳育種重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室；上海農(nóng)科院食用菌研究所農(nóng)業(yè)部食用菌遺傳育種重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室 南京210095 上海201106

【摘要】應(yīng)用順式調(diào)控元件探測載體G221構(gòu)建了一個(gè)香菇Lentinula edodes基因組文庫。G221為大腸桿菌-釀酒酵母穿梭載體,含有一個(gè)由酵母Cyc1基因基本啟動(dòng)子控制的lacZ標(biāo)記基因,能以轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)活性篩選香菇DNA片段。用這個(gè)基因組文庫轉(zhuǎn)化酵母菌,獲得了一批lacZ陽性轉(zhuǎn)化子。對(duì)其中表達(dá)較強(qiáng)的陽性轉(zhuǎn)化子進(jìn)行質(zhì)粒抽提和雙酶切鑒定,篩選到50個(gè)香菇順式調(diào)控元件DNA片段。對(duì)其中部分片段進(jìn)行了測序,并對(duì)其中一個(gè)序列進(jìn)行了序列分析,鑒別了該序列上的幾個(gè)與轉(zhuǎn)錄相關(guān)的特征序列。該研究也探討了利用酵母表達(dá)系統(tǒng)克隆香菇順式調(diào)控元件的可行性。 

【基金】上?？萍寂d農(nóng)重點(diǎn)攻關(guān)項(xiàng)目資金資助；

【關(guān)鍵詞】食用菌; 基因組文庫; 轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)活性; LacZ;