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    一種簡便、快速測定鵝膏多肽毒素的方法——抑芽法


    【發(fā)布日期】:2018-01-23  【來源】:菌物學(xué)報(bào)
    【作者】張志光 劉建強(qiáng) 張曉元 陳作紅 張?jiān)诤?/div>
    【機(jī)構(gòu)】湖南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
    【摘要】低濃度(5-10ngml-1)的鵝膏毒肽(amatoxins) 能專一性抑制RNA聚合酶Ⅱ的活性,高濃度(為RNA聚合酶Ⅱ103-104倍的濃度)也能抑制RNA聚合酶Ⅲ的活性,因而影響細(xì)胞mRNA的轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)的合成,抑制種子的萌發(fā)和生長。根據(jù)此原理我們建立了一種以植物種子萌發(fā)試驗(yàn)檢測鵝膏毒肽的方法,稱之為“抑芽法”(bud-inhibited assay)。該方法簡便、實(shí)用、準(zhǔn)確。操作流程:45℃干燥至恒重的鵝膏菌等子實(shí)體菌蓋;水提法提取毒素并用氯仿沉淀蛋白質(zhì)等;粗毒液濃度為0.025-0.05gml-1干子實(shí)體;蘿卜或綠豆種子培養(yǎng)溫度為28℃,培養(yǎng)時(shí)間為24-72h。綠豆芽下胚軸生長被抑制率在95%以上,可能為鵝膏毒肽含量高的劇毒鵝膏菌;當(dāng)被抑制率在60-80%,可能為鵝膏肽含量較低的微毒鵝膏菌;當(dāng)被抑制率在30%以下時(shí),可能是不含鵝膏菌肽的鵝膏菌。 
    【基金】國家科技部重點(diǎn)課題資助項(xiàng)目;
    【關(guān)鍵詞】抑芽法; 鵝膏多肽毒素; 鵝膏菌; 綠豆種子; RNA聚合酶Ⅱ;
     
     
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